厭氧培養箱安裝與使用

厭氧培養箱安裝

　　1.整機應安放在溫差較小、操作方便的位置，應避免陽光直曬和遠離采暖設備，放置平穩；

　　2.將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩，并分別裝好減壓閥（含壓力表），安置在適當位置；

　　3.接上氣路并檢查氣路，為防止漏氣，必要時可在各接管處用密封膠粘合；

　　厭氧培養箱使用

　　（一）操作室厭氧環境形成：

　　1.按使用要求放置好必要的附件和器具；

　　2.通電源開照明燈，開溫控儀，調節所需溫度；

　　3.操作室內放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑，并放入美蘭指示紙（封閉）；

　　4.關緊取樣室內外門，并抽真空校驗；

　　5.操作室內次置換（氮氣置換）：

　　A.把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊

　　B.接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥1，使手套鼓起，關閉閥門1，然后扎緊袋口；

　　6.操作室第二次置換（氮氣置換）重復一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。如此連續三次氮氣置換。

　　7.操作室第四次置換（混合氣體置換）：

　　（混合氣體配比為N285%、H210%、CO25%）

　　A.調換氣路打開混合氣閥3進氣，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關開閉排氣；

　　B.關掉混合氣體閥3，并打開閥5，使混合氣體經過流量計，調整流量計，流量為每分鐘10ml左右；

　　C.混合氣體重復2-3次轉換，經過上述過程，基本形成厭氧環境。

　　8.操作室內打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后打開美蘭指示紙觀察其變況，不變色為操作室內達到厭氧環境；

　　9.開紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理，滅菌時間按具體實驗自定。

　　（二）菌種的置入和培養：

　　1.檢查取樣室內門并關緊；

　　2.打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門；

　　3.取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打開氮氣閥2進氣，使指針回復零位，關掉閥2。第二次重復操作一次。第三次操作時，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打開閥4進混合氣，使指針回復零位，關掉閥

　　4。取樣室充氮置換三次過程結束；

　　4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數；

　　5.取樣室外門開啟、關緊，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）檢驗；

　　6.厭氧培養箱需要長期連續使用的條件：

　　A.每天在操作室內打開美蘭指示紙觀察，如不正常就必須重新換氣；

　　B.要長期連續輸入微量的混合氣體，使補進的氮氣能和微量的氧結合通過催化吸收，保證室內厭氧狀態，補入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右；

　　C.連續培養運行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。

　　D.操作室內溫度可任意選擇和控制。

　　7.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整：調節減壓閥，使輸出壓力0.1Mpa左右。

厭氧培養箱使用步驟

　　厭氧培養箱是一種在無氧環境下進行細菌培養及操作的裝置,可培養難生長的厭氧升物,又能避免以往厭氧生物在大氣操作時接觸氧氣而死亡的危險 。廣泛應用于醫學、免疫學、遺傳學、微生物、農業科學、藥物學的研究和生產，已經成為上述領域實驗室常用的儀器。我們在使用如何正確規范的操作厭氧培養箱呢，下面就做簡單介紹

一、操作形成厭氧環境

　　1、按使用要求放置好必要的配件和器具，并向操作室內放入二個無毒塑料袋。 
　　2、通電源開照明燈，開控溫儀，調節所需溫度及安全溫度。
　　3、操作室內放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑，并放入美蘭指示劑（封閉）。 
　　4、 關緊取樣室內外門，并抽真空校驗。
　　5、操作室內次置換（氮氣置換）： 
　　（1）先用橡皮管插入操作室內進氣口，另一頭插入塑料袋。
　　（2）接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥，使二只塑料袋充足氮氣，然后扎緊袋口。 
　　（3）把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。
　　（4）把塑料袋內氮氣漸漸地放于操作室內，至全部放出。 
　　6、操作室第二次置換（氮氣置換）重復一次充氮過程，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。
　　7、操作室第三次置換（混合氣體置換）： 
　　（混合氣體配比為：N2 85%；H2 10%；CO2 5%）。
　　（1）調換氣路打開混合氣道通閥門進氣，充氣時要隨時腳踏開關開閉排氣。 
　　（2）混合氣充滿塑料袋后，關掉混合氣直通閥（三通閥），使混合氣經過流量計輸入操作并調整流量計，流量為每分鐘10毫升左右。 
　　（3）把塑料袋內混合氣漸漸排于操作室內。 
　　（4）通過三次換氣后，操作室內氣體含氧量已處于極微量狀態。
　　8、操作室內打開鈀粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后打開美蘭指示劑（美蘭安瓶）觀察其變況，不變色為操作室內達到厭氧環境。 
　　9、開紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理。滅菌時間自定。 

二、菌種的置入和培養

　　1、檢查取樣室內門并關緊之。 
　　2、打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門。
　　3、 取樣室充氮置換三次過程：先抽真空度500毫米汞柱（66Kpa）以上停，然后人工打開氮氣閥門進氣，使指針回復零位后進行下次操作。 
　　4、如選定真空度較低就需要增加置換的次數。
　　5、取樣室內外門開啟，關緊要抽低真空度100毫米汞柱（13 Kpa）檢驗及幫助操作。 
　　6、厭氧培養箱需要長期連續使用的條件：
　　（1）每天在操作室內打開美蘭指示劑觀察，正常情況下使用。如不正常就必須重新換氣。 
　　（2）要長期連續輸入微量的混合氣體，使補進的氫氣能和微量的氧結合通過催化吸收，保證了室內厭氧狀態，補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右。 
　　（3）連續培養運行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。 
　　7、接種棒滅菌器的應用：
　　（1）隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌（接種棒）。 
　　（2）熔蠟處可直接放上，試管封蠟口旋轉熔蠟。
　　8、操作室里的培養箱內的溫度不可任意選擇和控制。 
　　9、調整混氮氣瓶、合氣瓶輸出壓力：調節減壓閥，使輸出壓力為0.1Mpa左右。